蛋白质沉淀法分为等电点沉淀法和盐析法，等电点沉淀法是利用在等电点溶解度最低、每种蛋白质具有不同等电点的特点进行分离的方法。在等电点，蛋白质分子以两性离子的形式存在，该分子的净电荷为零。（即正负电荷相等），此时蛋白质分子粒子在溶液中没有相同电荷的相互排斥，使分子间的作用力减弱，使粒子容易碰撞，聚集形成沉淀，使蛋白质在等电点处，其溶解度最小，容易形成沉淀物。许多物理性能，如粘度、膨胀性和等电点的渗透压都变小，有利于悬浮液的过滤。盐析是在蛋白质水溶液中加入中性盐，蛋白质随着盐浓度的增加而沉淀的现象。中性盐是一种强电解质，溶解度大，在蛋白质溶液中，它与蛋白质竞争水分子，破坏蛋白质胶体颗粒表面的水膜。另一方面，它中和蛋白质颗粒上的大量电荷，使蛋白质颗粒在水中积聚并沉淀。如果在某种蛋白质溶液中加入某种无机盐溶液，可以降低蛋白质的溶解度，使蛋白质凝集并从溶液中析出，这种作用称为盐析，是一种物理变化，可以恢复。在一定的蛋白质溶液中加入一定的重金属盐，使蛋白质的性质发生变化，使其聚集并从溶液中沉淀出来，这种作用称为变性，性质改变，是一种化学反应，不能恢复。将动物脂肪或植物油和氢氧化钠按一定比例放入皂化锅搅拌加热，反应后形成的高级脂肪酸钠、甘油、水形成混合物（胶体）在锅中加入食盐颗粒搅拌、静置，将高级脂肪酸钠与甘油、水分离，浮在液面。引起蛋白质沉淀的因子及作用机制是什么？蛋白质变性后发生沉淀。蛋白质沉淀作用是引起蛋白质沉淀的因素，盐析和变性会使蛋白质沉淀，但如果盐析条件控制良好，蛋白质不会失活，只要去除溶液中的中性盐，就可以再溶解。蛋白质的变性失去了生物活性，破坏了三维结构，在某些情况下可以通过再生恢复活性，但能够再生的蛋白质很少，条件也不同。关于盐析和变性的原理，一般认为盐析会夺取蛋白质的水合层，破坏表面电荷平衡，变性的情况较多，一般会破坏蛋白质自身精巧的结构，使蛋白质失活。蛋白质沉淀的原理是，并不是所有重金属盐的过量添加都会导致沉淀溶解。重金属盐之所以使蛋白质变性，是因为当溶液中的pH值高于等电点时，就会带负电荷，容易与带正电荷的重金属离子形成不溶性盐。当过量的重金属盐时，蛋白质分子重新排列成双电子层，沉淀物消失。但需要注意的是，无论沉淀物最终是否会再溶解，由重金属盐引起的蛋白质沉淀被称为不可逆沉淀物。蛋白质变性最常见的例子是煮鸡蛋，其中蛋白质被热变性成白色凝固物，被认为是沉淀，蛋白质变性。是（中毒），例如，在人体血液中加入一些毒蛇的毒液会形成沉淀或胶体，在蛋白质溶液中加入重金属使蛋白质聚集，或与胶体形成蛋白质盐析，一般是物理变化。（它也可能破坏其空间结构并使其退化）是可恢复的。换句话说，变性并不总是沉淀，它可以变成胶体，但沉淀并不总是变性。蛋白质沉淀机制PEG可以沉淀蛋白质，但噬菌体（包括病毒）的壳中含有蛋白质。因此，利用PEG沉淀功能，使噬菌体颗粒从溶液中沉淀出来，达到噬菌体浓缩的效果。PEG沉淀比浊法主要用于测定可形成悬浮物的沉淀物质，如微量磷、硫磺、氯、钙等，生物碱沉淀试剂形成的混浊也可以用这种方法测定。这是基于悬浮物的透射光或散射光的强度测量物质成分含量的分析方法。当光穿过混浊溶液时，悬浮物选择性地吸收部分光，悬浮物将部分光散射到各个方向，从而减弱透射光的强度。在水质监测和管理过程中，常采用比浊法测定饮用水、工业用水和废水的透明度。它还用于测量空气和其他各种气体中悬浮固体的含量，是研究空气和水污染的工具。所谓蛋白质沉淀作用蛋白质沉淀，外文名precipitation，破坏蛋白质分子水合作用或减弱分子间同型排斥作用的因子，降低蛋白质在水中溶解度沉淀转化为固体的分离方法。蛋白质沉淀操作中使用的方法很多，例如加入沉淀、盐析、溶剂沉淀、非离子型聚合物进行沉淀。加入多质沉淀等。蛋白质沉淀的作用醋酸的作用一般是通过与蛋白质争夺结合水，蛋白质分子之间凝集沉淀。重金属盐通常与蛋白质中的巯基SH结合，使蛋白质变性，导致蛋白质沉淀。蛋白质沉淀作用由于蛋白质的沉淀外界条件发生变化，蛋白质水合膜被除去，那个被中和的话，蛋白质作为块沉淀，不过，那个不变。使蛋白质沉淀的抗体硫酸铵沉淀法1.基本原理硫酸铵沉淀法是从大量的粗制剂中提取蛋白质，可以部分形成。这种方法可以从样品中分离出初级免疫球细胞，这是免疫球蛋白分离的常用方法。高浓度的盐离子与蛋白质溶液中的水分子竞争，破坏蛋白质表面的水合膜，降低溶解度并使其从溶液中沉淀出来。由于各种蛋白质的溶解度不同，不同浓度的盐溶液可以用来沉淀不同的蛋白质。这就是所谓的盐碱化。盐度通常以饱和度表示。硫酸铵因其溶解度高、温度系数小、不易使蛋白质变性而被广泛使用。2.试剂和仪器1.组织培养上清液、血清样品或腹水等2.组织培养上清液。硫酸铵NH4SO43。饱和硫酸铵溶液（SAS）4。蒸馏水5. PBS（含有0.2g/L叠氮钠）6。透析袋7.超离心机8。pH计9.磁力搅拌器3，操作程序以腹水或组织培养上清液为例，介绍了硫酸铵抗体沉淀。各种不同免疫球蛋白盐析所需的硫酸铵饱和度也不完全相同。用于抗体分离的硫酸铵饱和度为33%-50%。（1）将饱和硫酸铵溶液（SAS）的调制1.767g（NH4）2SO4搅拌到1升蒸馏水中，慢慢加入。用氨水或硫酸调整为硫酸pH7.0。饱和度为100%硫酸铵溶液（4.1mol/L，25° C）2.制备其他饱和度铵溶液（II）沉淀1.样品（如腹水）20，000'g离心30分钟，去除细胞碎片。2.储存上清液并测量其体积3.在搅拌的同时，缓慢地将等量的SAS添加到上清液中，最终浓度为1。1（4）将该溶液放入磁力搅拌器中搅拌6小时或过夜（4℃），使蛋白质完全沉淀。透析1.将蛋白质溶液10，000'g离心分离30分钟（4° C）沉淀物2.将沉淀物溶解在少量（10-20ml） PBS中-0.2g/L叠氮钠。沉淀物溶解后，将PBS放入透析袋？0.2克/升24叠氮钠？透析48小时（4℃），3℃完全去除硫酸氨。透析缓冲液每6小时更换一次。3.对透析液进行离心分离，测定了上清中蛋白质的含量。第四，应用提示（1）首先，预先沉淀低浓度的硫酸氨，以去除样品中的杂交蛋白。1.0.51v/v，一边搅拌一边慢慢地将SAS加入试料溶液中。2.将溶液用磁力搅拌器搅拌6小时或过夜（4℃）3.3000g离心分离30分钟（4° C），保持上清。上清SAS为0.5（1（v/v），再次离心分离得到沉淀物。将沉淀物溶解在PBS中，同时透析除去硫酸氨。4.上清SAS为0.5（1（v/v），再次离心分离得到沉淀物。将沉淀物溶解在PBS中，同时透析除去硫酸氨。5.当异蛋白质和待纯化蛋白质在硫酸氨溶液中的溶解度相差很大时，通过预沉淀去除异蛋白质是非常有效的。（2）为避免体积过大，可进行固体硫酸氨盐析（硫酸氨用量见表1）硫酸氨沉淀法与色谱技术相结合，可得到进一步纯化的抗体。版权声明：版权声明：上述内容的作者已申请原创保护，未经许可不得复制。有关授权事项、反对或投诉本内容，请与网站管理员联系。我会尽快回复你的。感谢您的合作!

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